بمجرد الخلايا التي نزرع فيها

مصنع الخليةملوثة، ومعظمها يصعب التعامل معها.إذا كانت الخلايا الملوثة ذات قيمة ويصعب الحصول عليها مرة أخرى، فيمكن استخدام الطرق التالية لإزالتها.

1. استخدم المضادات الحيوية

المضادات الحيوية أكثر فعالية في قتل البكتيريامصانع الخلايا.الأدوية المركبة أكثر فعالية من الأدوية وحدها.الدواء الوقائي أكثر فعالية من الدواء بعد التلوث.يستخدم الدواء الوقائي عمومًا مضادًا حيويًا مزدوجًا (البنسلين 100 وحدة / مل بالإضافة إلى الستربتومايسين 100 ميكروجرام / مل).بعد التلوث، يجب أن تكون طريقة التنظيف أكبر بمقدار 5 إلى 10 مرات من الكمية المعتادة.يجب استخدام الدواء لمدة 24 إلى 48 ساعة بعد الإضافة، ثم استبداله بالروتين المعتاد.سائل الثقافة.قد تكون هذه الطريقة فعالة في المراحل المبكرة من التلوث.بالإضافة إلى البنسلين والستربتوميسين، يمكن أن تشمل المضادات الحيوية المستخدمة أيضًا الجنتاميسين، والكاناميسين، والبوليميكسين، والتتراسيكلين، والنيستاتين، وما إلى ذلك. وعادةً ما يتم استخدام 400 إلى 800 ميكروغرام/مل كاناميسين أو 200 ميكروغرام/مل تتراسيكلين.يتم تغيير الوسيط كل يومين إلى ثلاثة أيام ويتم تمريره لمدة جيل إلى جيلين للعلاج.في السنوات الأخيرة، تم الإبلاغ عن أن 4-فلورو، 2-هيدروكسيكينولين (سيبروفلوكساسين، Cip)، مشتق بليو-روموتيلين (مشتق بليو-روموتيلين، BM-Cyclin2: BM-1 ومشتق التتراسيكلين (BM-2)) المضادات الحيوية هي فعالة في قتل الميكوبلازما عند استخدامها بمفردها أو مجتمعة.يتم تحضير جميع هذه المضادات الحيوية الثلاثة في محاليل مركزة 250X في برنامج تلفزيوني وتخزينها عند -20 درجة مئوية لاستخدامها لاحقًا.تركيز الاستخدام Cip هو 10 ميكروجرام/مل، BM-1 هو 10 ميكروجرام/مل، وBM-2 هو 5 ميكروجرام/مل.عند الاستخدام، قم أولاً بسحب وسط الاستزراع الملوث، وإضافة وسط الاستزراع RPMI1640 الذي يحتوي على BM-1، ثم نضح وسط الاستزراع بعد 3 أيام، وإضافة وسط الاستزراع RPMI1640 الذي يحتوي على BM-2، والاستزراع لمدة 4 أيام، وهكذا لمدة 3 أيام متتالية .جولات، حتى يتم إثبات بواسطة المجهر المصبوغ الفلورسنت 33258 أنه قد تم القضاء على الميكوبلازما، ثم يضاف وسط الاستزراع الطبيعي للثقافة والمرور 3-4 مرات.

2. المعالجة الحرارية

إن حضانة زراعة الأنسجة الملوثة عند درجة حرارة 41 درجة مئوية لمدة 18 ساعة يمكن أن تقتل الميكوبلازما، ولكن لها آثار ضارة على الخلايا.لذلك يجب إجراء اختبار أولي قبل العلاج لمعرفة زمن التسخين الذي يمكن أن يقتل الميكوبلازما إلى أقصى حد ويكون له أقل تأثير على الخلايا.هذه الطريقة غير موثوقة في بعض الأحيان.إذا تمت معالجته بالأدوية أولاً ثم تسخينه عند درجة حرارة 41 درجة مئوية، فسيكون التأثير أفضل.

3. استخدم المصل الخاص بالميكوبلازما

يمكن إزالة التلوث بالميكوبلازما باستخدام مصل مناعة ميكوبلازما الأرانب بنسبة 5% (عيار التراص الدموي 1:320 أو أعلى).نظرًا لأن الجسم المضاد المحدد يمكن أن يمنع نمو الميكوبلازما، فإنه يصبح سلبيًا بعد 11 يومًا من العلاج بالمصل المضاد ويظل سلبيًا بعد 5 أشهر.هو سلبي.ومع ذلك، فإن هذه الطريقة أكثر إزعاجًا وليست مريحة واقتصادية مثل استخدام المضادات الحيوية.

4. طرق أخرى

بالإضافة إلى الطرق المذكورة أعلاه لإزالة التلوث، هناك أيضًا طرق التلقيح والتعقيم في الحيوانات، وطرق البلعمة البلعمية، وطرق إضافة البروموروراسيل إلى الملوثزجاجات الثقافةومن ثم تشعيعها بالضوء وطرق الترشيح وغيرها، لكنها كلها أكثر إزعاجا وغير فعالة.لذلك، بمجرد حدوث التلوث بالميكوبلازما، ما لم تكن ذات قيمة مهمة بشكل خاص، يتم التخلص منها وإعادة زراعتها بشكل عام.

يرجى الاتصال واتساب وويشات: +86 180 8048 1709